




伴随着分子生物学技术性的快速发展趋势,以---混种杂交、---增加及---编码序列剖析等为代表的分子诊断和检测设备的关键功效日益突显。试品前解决所耗费的时间段占全部解析流程的60%,而检验偏差的90%发生在前解决行业。---获取做为分子诊断试验重要的一步,全自动---提取仪,其得到的---品---坏立即危害到中下游分子生物学实验的成功与失败。
磁珠法---提取仪的基本原理概括总结
1. 抽吸法,也叫移液法,是通过固定磁珠、转移液体来实现---的提取,一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:
1) 裂解:在样品中加入裂解液,通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应,细胞裂解,释放---。
2) 吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐低ph值下对---具有很强亲和力的特点,吸附---,在外加磁场作用下,磁珠与溶液分离,利用吸头将液体移出弃至废液槽,吸头弃掉。
3) 洗涤:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗涤缓冲液,充分混匀,去除杂质,在外加磁场作用下,将液体移出。
4) 洗脱:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗脱缓冲液,充分混匀,结合的---即与磁珠分离,从而得到纯化的---。
2. 磁棒法
磁棒法是通过固定液体,转移磁珠来实现---的分离,原理和过程与抽吸法的一样,不同的是磁珠和液体分离的方式。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附将磁珠从废液中分离开,放入下一步的液体中,实现---的提取。
磁珠法自动---提取仪又分为磁棒法和抽吸法
先说抽吸法:顾名思义,抽吸法就是通过自动移液装置来进行,通过自动移液装置来加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脱缓冲液。从步骤上好像没什么问题,但是抽吸法的问题在于,为了在去除废液的时候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠连同废液被抽掉,这样每一次抽废液的时候总有一小部分不能完全的抽走,---是磁铁在底部的装置,因为磁珠被磁铁吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,这样漂洗液就不能完全去除,残留的漂洗液中的盐和---会影响后面的洗脱效率和pcr成功率;磁铁在侧面的装置残留的液体会少些,但是洗脱的效率也不好,依靠dna自行溶解到洗脱缓冲液中,全自动---提取仪生产厂家,除非等上半小时以上,所以有些96自动---提取工作站,提取一轮的时间需要150分钟,32磁棒法的同样的时间可以提5轮了。
再说磁棒法---提取仪:通量通常有8、16、32、96通道,相对于抽吸法,磁棒法的优点是每一步的液体不残留,因为磁棒只带走磁珠,转移到下一个步骤相应的反应孔中,另外选择磁棒法的提取仪器尽量要功能更齐全的,比如可以加热,每个加热槽独立温控,全自动---提取仪价格,这样可以设置加热、裂解、洗脱的不同温度,另外很重要的一点是,带动磁棒的电机要能带动磁棒进行液体的快速混匀和搅拌,这样才有利于自动化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量选择尽量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有个很现实的问题,96个磁力棒在从一个板转移至另外一个板的时候,磁力棒上面的液体中途滴下来怎么办,全自动---提取仪多少钱,它会滴到别的孔中造成污染,而32通道的磁力棒运行轨迹不经过其他样本的上空,这样不会交叉污染。
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