




pcr,中文译为聚合酶链式反应,其实是一种dna的快速扩增技术,其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”那样。pcr技术通过两个短的称为引物的dna小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的dna量提高1000万倍。这种技术一问世,---引起了分子生物学研究的一场---,人们利用这种轰动全的技术很快就把微观领域的生物学研究---地往前推了一步。可以这么说,pcr技术使分子生物学研究一下子获得了突破,而且随着pcr技术的日趋完善,pcr在人类社会生活中的应用也越来越广泛。比如说在“dna指纹”中我们提到,科学家们只需要一根头发甚至一个细胞就可以完成dna指纹的鉴定工作,这里实际上就要采用pcr技术,因为一个细胞中的dna含量实在太少了,人们---不可能检测到它的指纹;有了pcr技术就好办了,通过pcr技术把这个细胞中的dn---断扩增1000万倍,这样dna量就足够作指纹鉴定了。再比如,在医院里检验---中的某种---,有时---量很少,通过传统的检查方法费力又费时,这时pcr技术也许就可以帮上忙。可以先选定这种---dna上的一段dna,设计合适的引物dna,然后通过pcr技术一扩增很快就可以判断出血样中是否扩增出了大量的dna,如果是的话,那么就说明血样中带有该种---了。pcr方法不但有---的灵敏度,迷你pcr仪多少钱,而且可以同时一次做近百个扩增反应,省时省力。
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简单的说,pcr就是利用dna聚合酶对特定基因做体外或试管内in vitro的大量合成,基本上它是利用dna聚合酶进行专一性的连锁拷贝。目前常用的技术,可以将一段基因拷贝为原来的一百亿至一千亿倍。根据dna扩增的目的和检测的标准,可以将pcr仪分为普通pcr仪,梯度pcr仪,原位pcr仪,实时荧光定量pcr仪四类。
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mullis起初使用的dna聚合酶是 dna 聚合酶 i 的klenow片段,1988年初,迷你pcr仪,keohanog改用t4 dna聚合酶进行pcr,其扩增的dn---段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种dn---段。但每循环一次,仍需加入新酶。1988年saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜thermus aquaticus 中提取到一种耐热dna聚合酶。
此酶具有以下特点:
耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,迷你pcr仪,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。
在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。
---提高了扩增片段特---和扩增效率,增加了扩增长度2.0kb。由于提高了扩增的特---和效率,迷你pcr仪厂家,因而其灵敏性也---提高。为与大肠多聚酶iklenow片段区别,将此酶命名为taqdna多聚酶taq dnapolymerase。此酶的发现使pcr广泛的被应用。
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